僅供科研實(shí)驗(yàn)、不得用于臨床

分類(lèi)：生化檢測(cè)
儲(chǔ)存條件：4℃,避光,12個(gè)月
用途：用于人或動(dòng)物的血清、血漿、腦脊液、細(xì)胞、組織等樣本中的膽固醇含量定量測(cè)定。
注意事項(xiàng)：鄰苯二甲醛試劑屬于膽固醇檢測(cè)(鄰苯二甲醛比色法)的核心成分，檢測(cè)原理是膽固醇及其脂，在強(qiáng)酸存在下與鄰苯二甲醛反應(yīng)，產(chǎn)生紫紅色化合物，該化合物在550nm波長(zhǎng)處有*吸收峰，分光光度計(jì)在550nm處進(jìn)行比色測(cè)定，膽固醇含量在4mg/ml之內(nèi)與吸光度呈良好線(xiàn)性關(guān)系。
標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：
1。先將PH7.00同PH4.00藥粉分別倒入250毫升蒸餾水中，充分溶解，用兩支玻璃瓶密封保存，做 好標(biāo)簽。
2 。在校正前，準(zhǔn)備ORP標(biāo)準(zhǔn)溶液。
3 。86毫伏：取50至100毫升PH7.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分?jǐn)嚢琛?/span>
4 。256毫伏：取50至100毫升PH4.00標(biāo)準(zhǔn)溶液置入一玻璃杯中，再加入稍許醌氫醌，充分?jǐn)嚢琛?5。 ORP標(biāo)準(zhǔn)液保存期為72hour。

注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。
使用方法：
1.  常用篩選濃度
注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于*次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn)，來(lái)確定*篩選濃度。
一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)（劑量反應(yīng)曲線(xiàn)）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。
1）  *天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)*；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。
2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1）     轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，*將細(xì)胞稀釋至豐度不過(guò)25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3）  篩選7天后觀(guān)察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]右旋酮洛芬氨丁三醇質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR(S)-Ketoprofen tromol

BPIFA2 Others Human 人 BPIFA2 / C20orf70 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 右旋酮洛芬氨丁三醇(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定(S)-Ketoprofen tromol

人食管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL植物凝膠(Sigma)質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分;SigmaP8169Phytagel

7WML6.0細(xì)胞，人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株 生孢梭菌 狗肺成纖維樣細(xì)胞;DogL1右旋酮洛芬質(zhì)量規(guī)格：>98.5%(S)-(+)-Ketoprofen

PPBP Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)甲氨蝶呤-甲基-d3質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Methotrexate-methyl-d3
倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3PROTEINASEK,20MG/MLSOLUTION蛋白酶K,20mg/ml溶液生物技術(shù)級(jí)5MLCOLD

JF-305細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人皮膚癌細(xì)胞系,HS-1細(xì)胞 KM小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤瘤株;G422本達(dá) Bqntczonq 2027-89-0

HuH-7(人肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Cytidine胞嘧啶核苷7.5KUBR，98%

Promocell C-22011 Endothelial Cell GrowthMedium 2, 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基2型(即用) 500mlKANAMYCIN50MG/ML卡那霉素溶液級(jí)20MLFrozen

人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞裂解物HPAFL(二甲基價(jià)酰按)
鄰苯二甲醛試劑HEPG2.2.15 肝癌細(xì)胞HBV病毒株草酰乙酸Oxaloacetic acid質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

CL-0290MDA-MB-468(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硫酸鋅七水(AR)Zinc sulfate, heptahydrate質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR

RLF, 大鼠成纖維細(xì)胞1酸鉀鈉四水Potassium  tatrate, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7 人子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL縮二脲Biuret質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞RNAHA-sp NA硫酸鎂無(wú)水(分子生物學(xué)級(jí))Magnesium sulfate anhydrous質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)