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購買前鑒別假冒偽劣ELISA試劑盒的方法:
一)、向廠家索要或從其網(wǎng)站下載說明書,查找ELISA的性能指標:準確度(加標回收率、稀釋線性)、精密度(板內差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準。一般來說,除了校準不一定每份說明書都有外,其余的指標一般都需要羅列(部分樣本需要高倍稀釋的,可能沒有準確度這個指標)。如果無法提供這些性能指標,則說明該試劑盒可能是假貨,或者試劑盒開發(fā)過程不夠科學嚴謹,有可能無法檢測出真實的樣本值。
二)、對于夸大ELISA涵蓋的指標的范圍,尤其是不常見的種屬,可先去國際ELISA試劑盒供應商(如eBioscience、R&D)網(wǎng)站上搜索,如果搜索不到該種屬的ELISA試劑盒,則有可能是假貨,需要小心謹慎。
三)、將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”等關鍵詞在網(wǎng)上搜索,有的網(wǎng)站或論壇如丁香園等會有打假曝光臺。
購買后鑒別假冒偽劣ELISA試劑盒的方法:
一、檢查說明書、包裝盒的質量,通常假冒偽劣產(chǎn)品為了降低成本,印刷的質量會比較差。其次仔細閱讀說明書,如上所示查找ELISA的性能指標。
二、1. 利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:
(1). 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液
(2). 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體
(3). 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物
(4). 實驗完畢后,檢測其標準曲線,如果標準曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(5). 如果標準曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。
2. 如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線。
(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復合物和底物。
(5) 實驗完畢后,檢測兩條標準曲線,如果兩條標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6) 如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
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